CRISPR/Cas9方法构建神经丛素B1敲除的Caco-2结直肠癌细胞株，邱丽娟，潘玥，成簇规律间隔短回文重复相关基因序列（CRISPR）系统在细菌中行使着清除外来入侵基因的使命，近期的研究中已经利用这一系统进行哺乳

CRISPR/CAS9技术在构建弓形虫微线体蛋白MIC3敲除株上的应用，王一凡，申邦，近年来，CRISPR/CAS9技术已经成为分子生物学和细胞生物学研究中的重要工具。刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）入侵和感染宿主细胞主要依赖�

利用CRISPR/Cas9构建约氏疟原虫有性阶段的荧光报告虫株，刘聪，张翠，利用实验室在疟原虫中建立的CRISPR/Cas9系统，本研究将疟疾致病寄生虫约氏疟原虫的內源基因Pyp28分别通过2A和60Linker两种短肽融合表达mChe

通过优化sgRNA参数提高果蝇CRISPR/Cas9系统的特异性与效率，许江，杨国华，CRISPR结合sgRNA的研究展示了其在基因组工程中的运用潜力。在使用Cas9核酸酶转基因果蝇时，与sgRNA有三个或更多核苷酸错配的基因组DNA区�

慢病毒系统和CRISPR/Cas9方法构建干扰信号素4D基因的结直肠癌细胞株，邱丽娟，潘玥，慢病毒载体系统是以HIV-1为基础发展起来的干扰或过表达分子生物学手段，成簇规律间隔短回文重复相关基因序列（CRISPR）结构在细菌中�

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Notch3基因敲除ACHN细胞株，陈旭，陈华迪，目的：Notch3信号参与了肾癌发生和发展，为进一步探讨其作用，借助CRISPR/Cas9技术获得Notch3敲除肾癌细胞 Notch3 -/-。方法：构建PXC9-puro-NOTC

CRISPR primer designer 本地化运行的单机版基因编辑引物设计软件、提高基因编辑特异性、自动分析Blast比对结果，直接生成最终引物，内置拟南芥和水稻基因组序列，自定义基因组后也可支持人、小鼠、果蝇、斑马鱼等多个物种的基因编辑引物设计。 简易使用教程： 第一步：把基因的 CDS 序列（注意是编码区序列）贴到框里，勾选 Local blast，点 Search PAMs 第二步，从弹出的对话框中，选择背景基因组（水稻/拟南芥，程序中内置了拟南芥和水稻的基因组序列，也可以自己上传其它物种分染色体的基因组序列），点 Blast 按钮。 系统自动执行搜索，并与背景基因组比对，等待…… 提示完成后，点确定按钮 到这一步，结果基本出来了，对每一个 PAM 进行了打分，分越低的越好，没有分的PAM不建议选用，因脱靶概率比较高，这个程序算法相对严格，因此候选的PAM一般比较少。选择一个 PAM（如果不选，默认的是分数最低的那个），再选择所用的载体名称（系统内置了一些常用载体的接头序列，也可以自定义其它载体），系统就直接给出了引物序列！ 拷贝过去合成，完成！ 参考文献： Yan, M., Zhou, S.-R., and Xue, H.-W. (2015). CRISPR Primer Designer: Design primers for knockout and chromosome imaging CRISPR-Cas system. Journal of integrative plant biology 57:613-617.

Humana Press 2015年出版的CRISPR-Cas9系统操作手册最新原版电子书。

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简介：设计高效且特异的CRISPR小指南RNA（sgRNA）是成功应用CRISPR技术的关键之一。 重要的是，已发现越来越多的具有不同原间隔子相邻基序（PAM）的新的RNA引导的核酸内切酶。 因此，迫切需要开发一种通用的工具来设计sgRNA，以满足不同的RNA指导的DNA核酸内切酶的需求。 为此，开发了名为“ CRISPR-offinder”的灵活的sgRNA设计程序。 此新程序的最重要功能是它支持所有已知的PAM类型以及客户定义的PAM。 此外，CRISPR-offinder可以通过脱靶位点数量找到基因组中的候选sgRNA并对其进行排名，还可以用于设计单个或成对的gRNA。 CRISPR-offinder可作为命令行程序免费获得，也可通过我们的网站进行访问。 可用性：CRISPR-offinder可从http://crispr-offinder.com/或http://crispr.igenetech.com/免费获得。