测量DNA损伤反应(DDR)成分激活的技术已在暴露评估和个性化医学中得到应用。 DDR和相关的DNA修复途径包含数百种蛋白质,因此对激活的详细测量在技术上既困难又费力。 我们研究的目的是在基于高通量电化学发光(ECL)的平台上开发某些DDR成分的蛋白质特异性检测方法。 我们为共济失调的毛细血管扩张症(ATM),检查点激酶2(CHK2),磷酸化的ATM S1981,磷酸化的CHK2 T68和磷酸化的肿瘤蛋白p53(p53)S15开发了五个有效的测定对。 我们针对细胞和癌症模型中的传统免疫印迹和γ-H2AX病灶措施验证了ECL结果。 为了在临床环境中测试基于ECL的技术,我们利用了接受计算机断层扫描(CT)扫描的患者的外周血单个核细胞(PBMC)。 CT扫描既代表着有价值的医学影像诊断,也代表着受控的电离辐射环境研究,因为它们能提供约2到31毫西弗(mSv)的电荷,并能激活DDR组件。 在这项研究中,我们表明基于ECL的技术可以测量患者PBMC样品中DDR成分的基础和损伤诱导水平。 使用盲法研究设计和患者匹配的CT扫描前后,我们显示ECL衍生的数据可以一致地(94%的时间,15/16例患者
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