论文研究 - 小麦/玉米杂种CENH3基因的合成，小麦的遗传转化，其染色体定位以及对小麦/玉米体细胞杂种的染色体行为的影响

着丝粒特异性组蛋白H3（CENH3）替代功能着丝粒核小体中的规范组蛋白H3，并在细胞分裂过程中忠实的染色体分离中发挥重要作用。 CENH3在识别外来着丝粒中也很重要，它决定了种间或基因间杂交中外来染色体的调节或消除。 在这项研究中，玉米全长CENH3在C端带有黄色荧光蛋白（YFP）标签（ZmCENH3-YFP），合成的杂交小麦wmCENH3带有从小麦CENH3的N端和玉米的组蛋白折叠域（HFD）在C末端（wmCENH3-RFP）标记有红色荧光蛋白（RFP）的标记通过生物弹弹转换转化为小麦。 通过PCR鉴定同时具有ZmCNEH3-YFP和wmCENH3-RFP基因的转基因小麦植物。 没有观察到ZmCENH3-YFP的表达，而wmCENH3-RFP的表达可以通过RT-PCR，直接荧光显微镜和抗RFP抗体的免疫染色来检测。 表达的wmCENH3-RFP以点状定位在细胞核上，表明其靶向小麦着丝粒。 在wmCENH3-RFP转基因小麦和表达ZmCENH3-YFP基因的转基因玉米之间进行了体细胞杂交，以研究体细胞杂种中的染色体行为。 体细胞杂交细胞的细胞学和FISH分析表明，无论有无wmCENH3