纤维素酶产生的部分纯化和表征

上传者: 38583286 | 上传时间: 2025-10-19 22:04:32 | 文件大小: 434KB | 文件类型: PDF
纤维素酶是由真菌,细菌,原生动物和白蚁产生的一种水解纤维素的酶。 它们以其在工业和医学中的各种应用而闻名。 这项研究的目的是纯化和研究尼日利亚奈科维阿纳姆迪·阿齐基韦大学从垃圾场分离的球形芽孢杆菌CE-3产生的纤维素酶的纤维素分解特性。 通过在30°C下进行30小时的深层发酵来生产酶。 通过在4M蔗糖溶液中透析,在Q-Sepharose FF上进行离子交换色谱法以及在Phenyl Sepharose CL-4B上进行疏水相互作用色谱法,将酶纯化至均质。 使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳评估酶的相对分子量。 还研究了温度,pH和金属对酶活性和稳定性以及各种底物的相对水解速率的影响。 该酶的纯化倍数为7.8,比活性蛋白为66.4μ/ mg,总产率为35.8。 该酶的相对分子质量范围估计在22.3 kDa-26.3 kDa之间。 孵育30分钟后,该酶在pH 9.0和40°C时具有最佳活性,在pH 9.0时稳定,并在50°C-100°C之间异常保留了90%以上的活性。 它被Mn2 +强烈激活,但被Ba2 +,Co2 +,Hg2 +,Pb2 +,Cu2 +,Sr2 +,Fe2 +,Ca2 +和Zn

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