着丝粒特异性组蛋白H3(CENH3)替代功能着丝粒核小体中的规范组蛋白H3,并在细胞分裂过程中忠实的染色体分离中发挥重要作用。 CENH3在识别外来着丝粒中也很重要,它决定了种间或基因间杂交中外来染色体的调节或消除。 在这项研究中,玉米全长CENH3在C端带有黄色荧光蛋白(YFP)标签(ZmCENH3-YFP),合成的杂交小麦wmCENH3带有从小麦CENH3的N端和玉米的组蛋白折叠域(HFD)在C末端(wmCENH3-RFP)标记有红色荧光蛋白(RFP)的标记通过生物弹弹转换转化为小麦。 通过PCR鉴定同时具有ZmCNEH3-YFP和wmCENH3-RFP基因的转基因小麦植物。 没有观察到ZmCENH3-YFP的表达,而wmCENH3-RFP的表达可以通过RT-PCR,直接荧光显微镜和抗RFP抗体的免疫染色来检测。 表达的wmCENH3-RFP以点状定位在细胞核上,表明其靶向小麦着丝粒。 在wmCENH3-RFP转基因小麦和表达ZmCENH3-YFP基因的转基因玉米之间进行了体细胞杂交,以研究体细胞杂种中的染色体行为。 体细胞杂交细胞的细胞学和FISH分析表明,无论有无wmCENH3
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